ලන්දේසි පර්යේෂකයන් පර්යේෂණාත්මක පරීක්ෂණයකදී CRISPR සහ bioluminescence ඒකාබද්ධ කරයිබෝ වෙන රෝග

නෙදර්ලන්තයේ පර්යේෂකයන් පවසන පරිදි, අලුතින් සංවර්ධනය කරන ලද නිශාචර ප්‍රෝටීනයක් වෛරස් රෝග හඳුනා ගැනීම වේගවත් කර සරල කළ හැකිය.
ඔවුන්ගේ අධ්‍යයනය, බදාදා ACS ප්‍රකාශනවල ප්‍රකාශයට පත් කරන ලද අතර, දීප්තිමත් නිල් හෝ කොළ පැහැති ප්‍රෝටීන භාවිතයෙන් වෛරස් න්‍යෂ්ටික අම්ල සහ ඒවායේ පෙනුම වේගයෙන් විශ්ලේෂණය කිරීම සඳහා සංවේදී, එක්-පියවර ක්‍රමයක් විස්තර කරයි.
න්‍යෂ්ටික අම්ල ඇඟිලි සලකුණු හඳුනාගැනීමෙන් රෝග කාරක හඳුනා ගැනීම සායනික රෝග විනිශ්චය, ජෛව වෛද්‍ය පර්යේෂණ සහ ආහාර සහ පාරිසරික ආරක්ෂාව නිරීක්ෂණය කිරීමේ ප්‍රධාන උපාය මාර්ගයකි.බහුලව භාවිතා වන ප්‍රමාණාත්මක පොලිමරේස් දාම ප්‍රතික්‍රියා (PCR) පරීක්ෂණ ඉතා සංවේදී වන නමුත් සංකීර්ණ නියැදි සකස් කිරීම හෝ ප්‍රතිඵල අර්ථකථනය කිරීම අවශ්‍ය වන අතර සමහර සෞඛ්‍ය ආරක්ෂණ සැකසුම් හෝ සම්පත් සීමා සහිත සැකසුම් සඳහා ඒවා ප්‍රායෝගික නොවේ.
නෙදර්ලන්තයේ මෙම කණ්ඩායම විවිධ සැකසුම් තුළ යෙදිය හැකි වේගවත්, අතේ ගෙන යා හැකි සහ භාවිතයට පහසු න්‍යෂ්ටික අම්ල රෝග විනිශ්චය ක්‍රමයක් සංවර්ධනය කිරීම සඳහා විශ්ව විද්‍යාල සහ රෝහල්වල විද්‍යාඥයින් අතර සහයෝගීතාවයේ ප්‍රතිඵලයකි.
ඔවුන් ගිනි මැස්සන්ගේ දැල්වීම්, ෆයර්ෆ්ලයි දිලිසීම සහ ජලජ ෆයිටොප්ලාන්ක්ටන්හි කුඩා තරු වලින් ආභාෂය ලබා ගත් අතර, ඒ සියල්ල ජීව විදුළි බව නම් සංසිද්ධියකින් බල ගැන්වේ.ලුසිෆෙරේස් ප්‍රෝටීනය සම්බන්ධ රසායනික ප්‍රතික්‍රියාවක් නිසා මෙම අඳුරේ දීප්තිය ඇති වේ.විද්‍යාඥයන් ඉලක්කයක් සොයා ගන්නා විට නිරීක්ෂණ පහසුව සඳහා ආලෝකය විමෝචනය කරන සංවේදකවලට luciferase ප්‍රෝටීන ඇතුළත් කර ඇත.මෙය මෙම සංවේදක ලක්ෂ්‍ය-ආරක්‍ෂක හඳුනාගැනීම සඳහා වඩාත් සුදුසු වන අතර, ඒවාට දැනට සායනික රෝග විනිශ්චය පරීක්ෂණ සඳහා අවශ්‍ය ඉහළ සංවේදීතාවයක් නොමැත.CRISPR ජාන සංස්කරණ ක්‍රමයට මෙම හැකියාව සැපයිය හැකි අතර, සංකීර්ණ, ඝෝෂාකාරී සාම්පලවල තිබිය හැකි දුර්වල සංඥා හඳුනා ගැනීමට බොහෝ පියවර සහ අමතර විශේෂිත උපකරණ අවශ්‍ය වේ.
පර්යේෂකයන් විසින් CRISPR ආශ්‍රිත ප්‍රෝටීනයක් සරල ඩිජිටල් කැමරාවකින් හඳුනාගත හැකි ජෛව ආලෝක සංඥාවක් සමඟ ඒකාබද්ධ කිරීමට ක්‍රමයක් සොයාගෙන ඇත.විශ්ලේෂණය සඳහා ප්‍රමාණවත් තරම් RNA හෝ DNA සාම්පලයක් ඇති බව තහවුරු කර ගැනීම සඳහා, පර්යේෂකයන් විසින් recombinase polymerase amplification (RPA) සිදු කරන ලද අතර එය 100°F පමණ නියත උෂ්ණත්වයකදී ක්‍රියා කරන සරල තාක්ෂණයකි.ඔවුන් Luminescent Nucleic Acid Sensor (LUNAS) නමින් නව වේදිකාවක් නිපදවා ඇති අතර, එහි CRISPR/Cas9 ප්‍රෝටීන දෙක වෛරස් ජෙනෝමයේ විවිධ යාබද කොටස් සඳහා විශේෂිත වන අතර, ඒ සෑම එකක්ම ඉහත ඒවාට සම්බන්ධ කර ඇති අද්විතීය ලුසිෆරේස් කැබැල්ලකි.
විමර්ශකයන් පරීක්ෂා කරන විශේෂිත වෛරස් ජෙනෝමය පවතින විට, CRISPR/Cas9 ප්‍රෝටීන දෙකක් ඉලක්කගත න්‍යෂ්ටික අම්ල අනුපිළිවෙලට බන්ධනය වේ;රසායනික උපස්ථරයක් ඉදිරියේ නොවෙනස්ව පවතින ලුසිෆෙරේස් ප්‍රෝටීන් සෑදීමට සහ නිල් ආලෝකය විමෝචනය කිරීමට ඉඩ සලසමින් ඒවා සමීපව පවතී..මෙම ක්‍රියාවලියේදී පරිභෝජනය කරන උපස්ථරය ගණනය කිරීම සඳහා, පර්යේෂකයන් හරිත ආලෝකය විමෝචනය කරන පාලන ප්‍රතික්‍රියාවක් භාවිතා කළහ.කොළ සිට නිල් දක්වා වර්ණය වෙනස් කරන නලයක් ධනාත්මක ප්රතිඵලය පෙන්නුම් කරයි.
පර්යේෂකයන් RPA-LUNAS විශ්ලේෂණය සංවර්ධනය කිරීමෙන් ඔවුන්ගේ වේදිකාව පරීක්ෂා කර ඇතSARS-CoV-2 RNAවෙහෙසකර RNA හුදකලා කිරීමකින් තොරව, සහ නාසෝෆරින්ක්ස් ස්පුබ් සාම්පල මත එහි රෝග විනිශ්චය කාර්ය සාධනය පෙන්නුම් කළේය.COVID-19රෝගීන්.RPA-LUNAS විසින් SARS-CoV-2 මිනිත්තු 20ක් ඇතුළත RNA වෛරස් භාරයක් පිටපත් 200/μL තරම් අඩු සාම්පලවලින් සාර්ථකව අනාවරණය කර ගන්නා ලදී.
පර්යේෂකයන් විශ්වාස කරන්නේ ඔවුන්ගේ විශ්ලේෂණයට වෙනත් බොහෝ වෛරස් පහසුවෙන් සහ ඵලදායී ලෙස හඳුනාගත හැකි බවයි."RPA-LUNAS සත්කාරක බෝවන රෝග පරීක්ෂාව සඳහා ආකර්ශනීයයි," ඔවුන් ලිවීය.